3.2.3.1 氨基酸脱氨基作用 3.2.3.1 氨基酸脱氨基作用:谷氨酸脱氢酶(GDH)活性测定中NADP⁺/NAD⁺双辅因子干扰的实战解耦方案 你有没有在凌晨两点盯着一块泛着微黄的比色皿发呆? 那不是培养基污染——是NADP⁺在悄悄篡改你的动力学曲线。 你反复校准分光光度计,重配缓冲液,换三批新鲜肝线粒体匀浆,却始终无法复现文献中GDH对α-酮戊二酸的典型双相饱和动力学;Vₘₐₓ像被橡皮擦抹过,Kₘ值漂移超过40%;更诡异的是,当把反应体系从pH 7.4调到8.0,酶活非但没升,反而骤降35%…… 这不是操作失误。