2.3.2 扩增技术:PCR 扩增 vs. 体外转录(IVT)


文档摘要

2.3.2 扩增技术:PCR 扩增 vs. 体外转录(IVT) 在单细胞转录组文库构建的精密链条中,2.3.2节所承载的并非一个简单的“选择题”——它是一道必须用移液枪尖端去作答的工程命题。当微量cDNA(常低至10–100 fg)躺在PCR管底,你按下热循环仪启动键的那一刻,你不是在运行一段程序;你是在调度一场分子尺度的战争:一边是DNA聚合酶以毫秒级精度复制双链的暴烈增殖,另一边是T7 RNA聚合酶在体外模拟核质环境、以单链RNA为唯一产物的静默扩增。PCR与IVT,表面看是两种扩增技术的并列比较;实则,它们代表了两条根本不同的分子信息保真路径——一条忠于序列拷贝的几何级数放大,另一条执着于表达丰度的线性比例重建。


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