7.1.1 批次效应(Batch Effects)的复杂性与校正方法(Harmony, LIGER) 在单细胞转录组学的现实战场上,我们常遭遇一种看似沉默、却足以瓦解整个生物学结论的“幽灵”——它不携带突变,不表达异常基因,不触发通路富集信号;它只是悄然地、系统性地扭曲细胞间的相似性度量。当一批来自周一上午冻存的PBMC样本,在t-SNE图上固执地聚成一团蓝点,而另一批周四下午新鲜分离的同源样本则凝结为一簇红点,纵使它们在生物学上本应混杂交织——这时,你面对的,不是新发现的免疫亚群,而是批次效应(Batch Effect)。它不是噪声,而是有结构的偏倚;不是误差,而是嵌入高维空间几何中的系统性形变。 这绝非数据预处理环节中可被简单“归一化掉”的次要问题。