2.1.2.1 整合机制与外周血干细胞改造

文档摘要

2.1.2.1 整合机制与外周血干细胞改造 2.1.2.1 整合机制与外周血干细胞改造：当HIV-1的“劫持引擎”撞上CD34⁺细胞的染色质守门人——一个被忽视却致命的整合位点偏好偏差，及其可工程化的矫正方案你有没有在凌晨三点盯着流式图发呆？不是因为细胞没转染成功，而是——明明MOI调到15、polybrene浓度精准至8 μg/mL、离心感染法严格执行、CD34⁺细胞活率＞92%，可三天后qPCR显示GFP拷贝数稳定在0.8–1.2/细胞，而三代慢病毒载体（pLenti-CMV-GFP-Puro）的理论整合效率应达2.5–3.5/细胞。更诡异的是，单细胞RNA-seq揭示：约37%的GFP⁺细胞中，GFP转录本丰度低于背景噪声的2.3倍；