3.1.1.1 慢病毒(LV):高装载量与整合特性 3.1.1.1 慢病毒(LV):高装载量与整合特性 ——当“高装载量”撞上“基因组毒性”,我们如何用一个启动子序列,在2.5 kb的夹缝中稳住GFP-Cas9融合蛋白的表达? 你有没有在深夜盯着那张Western blot发呆:明明质粒转染后GFP信号亮得刺眼,慢病毒感染T细胞48小时后,流式却只捡到3.7%的阳性率? 你反复核对MOI、polybrene浓度、离心感染参数,甚至重做了三代包装质粒测序——结果发现,问题既不在VSV-G包膜,也不在pMD2.G表达量,而藏在你亲手敲进pLenti-CMV-GFP-Cas9里的那个CMV启动子里。 这不是偶然。